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  • 技術服務

    Technical Services

    RNA干擾

    在生物體中,siRNA,miRNA, ASO介導的 RNA 干擾(RNAi)所引起的基因沉默,是一種重要的基因表達調控方式,其可特異性引發靶mRNA降解或蛋白翻譯表達抑制,從而減少基因表達與功能發揮。

    由于RNAi通常靶向是上游的mRNA、lncRNA、circRNA、miRNARNA分子,且引起的上下游基因作用機制存在多樣性,所以RNAi具有能夠實現很多小分子和單抗無法成藥的優勢,比如蛋白結構復雜或不明確的靶點、剪切突變的靶點、lncRNA、circRNA、miRNA調控的靶點等。目前,全球范圍內已有上百種RNAi 藥物進入臨床研究,已有多款siRNA獲得審批,RNAi藥物研發將引領未來10年新型藥物發展浪潮。

    為此,百力格推出了siRNA(小干擾RNA)、ASO(反義寡核苷酸)、miRNA mimics/inhibitor/agomir/antagomir等多種RNA/DNA調控小核酸產品(包括常規小核酸產品及特殊序列與優化的小核酸產品),助力基因研究與藥物靶點的研發。



    siRNA

    在基因功能研究與藥物開發領域,與小分子抑制劑、化藥或抗體相比,siRNA的首要優點在于高特異性、高通量篩選。siRNA可以針對不同目的基因,通過優化RNAi靶向序列的位置及修飾方式,實現基因表達沉默并可進一步快速開發新的藥物,其篩選和開發時效通常優于化藥和抗體藥。


    優勢
    1. 采用專業的技術設計、特殊優化的序列及修飾,確保siRNA可達到70%以上的沉默效果;
    2. 針對同一mRNA的更多區域設計合成siRNA,提高沉默靶基因的成功率;
    3. 售后承諾:公司將根據您提供的實驗數據(轉染效率圖片或陽性對照結果【可以二選一,需達到80%轉染效率或陽性干擾效果達到70%】與qPCR引物及原始結果),通過qPCR鑒定,套裝中3對siRNA確定沒有任何一條在任何一株細胞未達到70%的沉默效果情況下,承諾重新設計并免費合成一次針對靶基因的另外3對siRNA并贈送相應對照。




    常規siRNA

    常規siRNA為常規化學合成的無化學修飾雙鏈RNA,特異性靶點設計,覆蓋人、小鼠、大鼠全基因組的所有基因,其他物種也可根據客戶需求進行定制化合成,適合進行各種細胞RNAi初步篩選實驗。

    常規siRNA多為19 nt RNA + dTdT (3’兩端懸垂)RNA雙鏈分子,未經任何化學修飾。大于19個堿基需添加備注(是否需加雙端懸垂dTdT)。siRNA套裝三保一售后僅針對NCBI Entrez Gene 收錄的人、小鼠、大鼠蛋白編碼基因。



    修飾siRNA

    由于siRNA的穩定性較差,在體內容易被核酸酶降解,不易被組織吸收,使得其在體內的應用受到了限制。對合成的siRNA進行化學修飾能夠增加siRNA的穩定性,同時有效抑制目的基因的表達。正確的修飾可以極大地促進RNAi 藥物從體外到體內、從實驗室到臨床應用的轉化。siRNA的化學修飾主要有三類:磷酸骨架修飾、核糖修飾和堿基修飾,此外,也可以進行熒光染料標記用于跟蹤細胞或動物體內siRNA的吸收和分配過程。


    UHP siRNA
    采用高效專業軟件與人工深入分析相結合的siRNA設計方法,利用新型設計方法原則、脫靶效應預測算法和化學修飾方法的優勢,盡可能確保每一條siRNA序列具有超高表現的沉默特異性、高效性及穩定性,從而減少由于沉默效果不佳而導致實驗失敗的次數,產生更為優秀和可重復的實驗數據。


    動物級 in vivo-siRNA
    動物用in vivo-siRNA是采用行業領先合成平臺、方法工藝和產品質控體系,通過特殊化學修飾方式,具有高效、特異、穩定、低毒等優勢,可以直接注射動物的體內實現全身或局部給藥,in vivo-siRNA可以出色的實現體內RNAi 效益等相關研究。廣泛應用于動物疾病模型關鍵基因靶標確認的研究中,如通過抑制致病基因表達治療疾病。
    百力格采用特有siRNA化學修飾技術與高品質原料,通過嚴格質量檢測控制體系,有效增強in vivo-siRNA的穩定性。在具有良好siRNA血清穩定性條件下,保持siRNA高效活性,降低免疫原性,更大限度降低siRNA對實驗動物的毒性,滿足給藥要求,有效提高in vivo-siRNA生物利用度。


    優勢
    a. 精確序列設計,有效提高沉默效率,降低脫靶效應;
    b. 特殊化學修飾,有效增加穩定性,降低免疫原性;
    c. 特殊標記提高體內利用度,實現靶向導入;
    d. 嚴格工藝控制,去除有機物,無機物,及潛在內毒素等;
    e. 合成規格大,通量高,可實現同批次多條序列g級別合成;
    f. 每批次均可質量溯源并提供完整質量文件。


    應用
    1. 臨床前體內RNAi藥物靶點開發驗證;
    2. RNAi藥物體內分布、代謝研究;
    3. RNAi藥物體內毒性研究。



    miRNA

    miRNA(microRNA)是一類內源性的小非編碼RNA,長度約為17-25 bp,能夠通過與靶mRNA特異性結合,引起靶mRNA的降解或抑制其翻譯,從而參與基因的轉錄后調控。miRNA參與基因多種調控途徑,從胚胎發育、病毒防御、造血過程、器官形成、細胞增殖和凋亡、脂肪代謝到腫瘤生長。miRNA在一系列生理和病理過程中發揮著重要的作用,并被篩選成為可靠的疾病生物標志物。此外,科學家們目前也在嘗試通過改變miRNA的功能、開發新的作用機制,如調控基因組表達,使其可能成為對疾病的有效干預與治療手段。


    服務詳情



    服務詳情


    訂購提示
    1. 客戶需提供最新miRBase 數據庫中人、小鼠、大鼠的所有miRNA mimic、inhibitor、precursor,具體ID信息(如需成熟體需備注清晰需要做3p或5p);
    2. 如果定制其它物種的miRNA mimic、inhibitor、precursor及miRBase未收錄的成熟體miRNA,客戶需提供具體序列信息;
    3. 最小訂購量為5 nmol,帶修飾的定制類miRNA最小起訂量5 nmol。

    產品信息




    ASO
    反義寡核苷酸 (Antisense oligonucleotide, ASO) 是一種單鏈DNA或嵌合體的寡核苷酸,長度通常為15-25個堿基,通過其堿基順序排列與目標RNA序列互補雜交可介導RNase H對RNA的切割,從而抑制非編碼RNA(如miRNA、siRNA、piRNA、snoRNA、snRNA、exRNA、scaRNA 和lncRNA)的功能或阻止mRNA的蛋白翻譯。為了提高核酸酶抗性,在骨架序列中引入硫代磷酸酯(Phosphorothioate, PS) 鍵可用于提高核酸酶抗性,從而增強細胞內穩定性。具備同時干擾胞質和核內的RNA能力,可直接用于體內實驗。

    優勢

    1. 序列設計特異性高,可針對多種基因進行干擾;
    2. 具備入核能力,經化學修飾,穩定性高,體內作用時間長;
    3. 經特殊標記后可直接用于體內實驗,可以配套遞送轉染試劑或單獨使用;
    4. 相對病毒等載體,合成周期短,成分工藝可控性高,適于后續核酸藥研發。

    服務詳情


    訂購提示
    BLG-siASO為siRNA和ASO混合形式,可同時抑制核內或核外的目的lncRNA、mRNA或circRNA的有效干擾。


    shRNA載體構建

    RNA干擾(RNAi)是一種有效敲低基因表達和研究各種細胞類型中RNA與蛋白表達調控的切實可行的方法。與傳統的小/短干擾 RNA (siRNA, miRNA mimics) 相比,使用載體或病毒載體介導RNAi實驗能進一步拓展應用的可行性,例如在載體上進行各種標記或篩選等。


    優勢

    1. 通過標簽可以實現瞬時觀察或穩定的篩選等目的;

    2. 可以實現多種細胞類型中進行RNAi實驗,如病毒介導的難轉染的原代細胞和非分裂細胞;
    3. 通過誘導型RNAi表達來調控基因抑制;
    4. 篩選出能穩定表達RNAi序列的純細胞群;
    5. 通過組織特異性啟動子來調控預期目的細胞或其他非必需的體內基因表達調控。


    產品信息


    訂購提示
    需要明確基因ID信息、載體類型及訂購規格。


    CpG佐劑合成
    CPG ODN(CpG oligonucleotide, CpG寡脫氧核苷酸)是一類人工合成的含有非甲基化的胞嘧啶鳥嘌呤二核苷酸(CpG)的寡脫氧核苷酸 (ODN)序列,其長度大概10~30bp之間??梢阅M外源性DNA如細菌DNA、激活巨噬細胞和樹突狀細胞,間接激活NK細胞和T細胞等多種免疫效應細胞產生天然免疫反應,增強免疫應答強度,在抵抗病原入侵及抗腫瘤等方面起到免疫增強劑的作用。同時CpG ODN有促進TH1偏向性免疫,抑制TH2細胞介導的過敏反應。因此,CpG-ODN在抗細菌、抗病毒、抗過敏反應等疾病的預防和治療領域具有廣闊的應用前景。

    優勢

    根據CpG ODN的不同序列結構特征以及誘導的免疫效應,將CpG分為A、B、C三類,實現不同免疫目的需要:
    A類:CpG ODN以含有CpG二核苷酸的回文序列為核心,兩端為poly G尾,磷酸二酯鍵骨架為部分硫代修飾,通過回文序列和poly G形成高級結構,能夠活化漿細胞樣樹突狀細胞產生大量I型干擾素,但對B細胞活性弱;
    B類:CpG ODN是一種全硫代修飾的線性CpG ODN,對B細胞有很強的免疫刺激活性,但不能活化漿細胞樣樹突狀細胞;
    C類:CpG-ODN是一類全硫代修飾的CpG ODN,能通過回文序列形成二聚體,兼具A型和B型CpG-ODN的活性,既能活化漿細胞樣樹突狀細胞,又能活化B細胞。

    產品信息







    名稱:百力格生物科技(上海)股份有限公司

               BiOligo Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.

    地址:上海市松江區書海路99號23幢

    電話:021-67616018

    郵箱:blg-mkt@bioligo.cn

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